台灣農業研究

誘引劑對高氏柴胡懸浮細胞生長與柴胡皂苷含量累積之影響

作者:陳威臣、夏奇鈮、葉茂生、曹進義、蔡新聲*

摘要:

高氏柴胡 (Bupleurum kaoi Liu, Chao et Chuang) 懸浮細胞於含有 0.2 mg/L 二氯苯氧基乙酸 (2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2,4-D) 之 1/2 MS 液態培養基中於低光照下以 100 rpm 轉速培養,細胞之生長在接種後 0–2 週為緩慢生長期,在 2–4週呈現快速生長期,在培養 4 週後進入生長靜止期。振盪速度試驗結果顯示,80 rpm 較 100 rpm 振盪速率在培養 4 週後,具有較高之細胞生長量。細胞接種密度試驗結果顯示,以 12% 密度接種之細胞生長最佳,接種密度較高 (24%) 或較低 (6%) 的細胞生長表現均較差,但同樣接種密度 (12%) 下,以較大培養容器為佳 (125-mL vs. 250-mL 錐形瓶)。添加誘引劑之試驗結果顯示,在處理 2 週後,所有誘引劑處理之細胞鮮重皆受到顯著抑制;但在細胞乾重方面,酵母抽出物處理與對照組之乾重相較並無顯著差異,僅茉莉酸與高濃度離層酸處理對細胞乾重有顯著抑制之效果,但三種誘引劑處理對懸浮細胞之柴胡皂苷 (saikosaponin a 及saikosaponin d) 累積均有促進效果,柴胡皂苷含量可提高 1.9–2.0 倍,產量可提高1.6–1.8 倍。進一步施用 500 mg/L 酵母抽出物作為誘引劑,結果顯示施用 2 週後柴胡皂苷含量較對照組增加 2.1 倍,而柴胡皂苷產量可達對照組之 2.8 倍,顯示在細胞生長後期施用誘引劑並在特定反應時間後收穫細胞,有助於二次代謝產物柴胡皂苷之產生與累積。

關鍵字:高氏柴胡、藥用植物、懸浮細胞培養、柴胡皂苷、誘引劑

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最後異動時間:2023-06-30 10:47:00
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