台灣農業研究

【研究簡報】胡瓜嵌紋病毒火球花分離株之鑑定與檢測

作者:陳金枝*、江芬蘭

摘要:

本研究由火球花 (Haemanthus multiflorus Martyn.) 葉片呈現黃斑病徵者取其罹病組織,經由汁液機械接種於奎藜 (Chenopodium quinoa Willd.) 葉片所得之單斑 (single lesion) 而獲得YS1 分離株。續於間接式酵素連結免疫反應 (Indirect enzyme-linked immunosorbent assay; indirect-ELISA) 中,火球花自然罹病葉、YS1 分離株所感染之奎藜局部病斑及菸草 (Nicotiana benthaminana Domin) 系統性嵌紋病葉等受測樣品,均可與胡瓜嵌紋病毒 (Cucumber mosaic virus; CMV) 多元抗體產生正反應。而於反轉錄-聚合酶鏈鎖反應 (reverse transcriptionpolymerase chain reaction; RT-PCR) 反應中,上述3 種受測樣品之全量核酸,均可與CMV 引子對 (CMV-up / CMV-dw) 產生預期大小約485 bp 之核酸片段。YS1 之鞘蛋白 (YS1-CP) 核酸序列登錄於GenBank 取得核酸分子序號為KM066122,YS1-CP 之胺基酸序列與其他已知CMV 之相同度均高於90%。由血清學及核酸分子特性之鑑定結果,顯示由火球花分離而得之YS1 為CMV 之分離株。CMV 寄主範圍廣泛,本研究之結果乃CMV 之新寄主紀錄。本研究分別以TPS (Thomson & Dietzgen 1995) 及自製之PSE 緩衝液快速萃取罹病植物組織之全量核酸,以其為模板進行RT-PCR,均可成功增幅出YS1 病毒之預估核酸片段,結果證實此種核酸快速萃取法可用於CMV 之核酸快速檢測,具有相當高之應用潛力。

關鍵字:胡瓜嵌紋病毒、火球花、免疫分析、RT-PCR 快速檢測

下載:https://scholars.tari.gov.tw/bitstream/123456789/14068/1/64-1-8.pdf下載 Pdf 檔 PDF 連結

最後異動時間:2023-06-09 15:25:00
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