作者：夏奇鈮、陳金枝、林南欣、蔡媦婷*

摘要：

本研究利用切取自短縮莖及擬原球體 (protocorm-like body; PLB) 之薄片培植體配合利巴韋林 (ribavirin)不同濃度與處理時間進行蝴蝶蘭去病毒研究。試驗材料為確知感染蕙蘭嵌紋病毒 (Cymbidium mosaic virus; CymMV) 之蝴蝶蘭「台農1 號小精靈」組織培養瓶苗，以瓶苗去葉後之短縮莖切取厚約1 mm薄片作為培植體，將薄片培植體置入含有不同濃度ribavirin 之液體培養基中震盪培養1–5 d 後，移至不含ribavirin 之固體培養基中培養；或將薄片培植體於含有較低濃度ribavirin 之固體培養基中持續培養一代或二代，培養期間除調查培植體的存活率外，當長出之小芽其葉片或根長度達1 cm 以上時，切取其葉片或根以間接式酵素連結免疫吸附反應法 (indirect enzyme-linked immunosorbent assay; Indirect-ELISA) 進行病毒檢測，其中ELISA 檢測呈陰性反應之芽體續以反轉錄核酸聚合酶鏈鎖反應 (reverse transcription polymerase chain reaction; RT-PCR) 進行檢測。試驗結果顯示，以250 mg L^-1 ribavirin 液體培養1 d 以上即明顯降低培植體之成活率；ribavirin 濃度降至25–75 mg L^-1 之間處理1–5 d，則不具去病毒之效果；但若於50 mg L^-1 ribavirin 液體培養基中浸泡2 d 後，再繼代於含有25 mg L^-1 ribavirin 之固體培養基中繼續8–12 wk 培養，去病毒率為26.7%。此外，切取自短縮莖與切取自PLB 之薄片培植體於低濃度 (12.5–37.5 mg L^-1) ribavirin 固體培養基中進行二階段培養，短縮莖與PLB 培植體之去病毒率最高分別為29.2% 及22.2%，但PLB 薄片培植體之對照組 (未施用ribavirin) 去病毒率可高達100%。綜合本研究之結果，建議採用具有高再生能力之培植體，以對植物細胞毒傷害較小但具抑制病毒增生之低濃度ribavirin 配合繼代處理，具有提高去病毒之效果。

關鍵字：蘭科植物、薄層細胞培養、擬原球體

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