台灣農業研究

甘藷基腐病菌專一性PCR檢測技術之研發

作者:林靜宜、黃巧雯、楊宏仁、賴素玉、倪蕙芳*

摘要:

甘藷基腐病 (foot rot) 是由Phomopsis destruens 所引起,為近年來台灣甘藷生產的主要限制因子之一。目前P. destruens 之鑑定仍依賴傳統方法,以病原菌之組織分離及形態特徵為主,不但耗時費力且成功分離出病原菌之比率不高。本研究依據P. destruens 之去氧核醣核酸的內轉錄區 (internal transcribed spacer; ITS) 序列設計專一性引子對,並利用聚合酶連鎖反應 (polymerase chain reaction; PCR) 建立甘藷基腐病菌之檢測技術。結果顯示,本研究開發之檢測方法可專一性檢測P. destruens,且對經常可於甘藷塊根上分離之Lasiodiplodia theobrome (B2225)、Phomopsis sp. (Ph735)、Rhizopus sp.、Athelia rolfsii (Sc-3) 及Fusarium sp. (Fu245) 等其他真菌並無誤檢反應。此法之靈敏度可達1 ng 之菌絲DNA,若利用巢式PCR (nested PCR) 則靈敏度可提高至10 pg 之菌絲DNA。此外,本檢測方法亦可運用於分析受感染之甘藷莖部與塊根組織。而此技術於感染植物組織之檢測成效良好,93% 之受感染植物樣本可檢測出病原菌,相較於傳統鑑定法之38%,可大幅提升其檢測成功率。此專一性PCR 檢測法具有快速、專一性及靈敏度高之優點,未來可將此技術應用於檢測甘藷是否感染基腐病。

關鍵字:甘藷、甘藷基腐病菌、甘藷基腐病、PCR 分析

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最後異動時間:2021-11-17 16:30:00
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