作者：周建銘、陳君弢、簡伊萱、蔡錦慧、陳金枝、林鳳琪、陳怡如、鄧汀欽*

摘要：

自雲林縣虎尾地區採集具褪綠、黃化及褐化乾枯病徵之玉米病害樣本，並將其機械接種於甜玉米‘Honey-236’ 可產生類似褪綠斑駁病徵，並獲得一個分離株 (稱為NFU2)。樣本以簡併式引子對進行反轉錄聚合酶鏈鎖反應 (reverse transcriptase polymerase chain reaction; RT-PCR)，可增幅出預期大小 (1.4 kb) 產物，經解序後序列與玉米褪綠斑駁病毒 (Maize chlorotic mottle virus; MCMV) 中國Yunnan3 分離株 (Acc. No. JQ982469)相同度達99%。將MCMV NFU2 分離株全基因體解序後，其全長為4,436 nt，經親緣分析後MCMV 共可分為美國分離株、中國分離株、東非分離株及台灣分離株等四個分群；若將其鞘蛋白序列進行親緣分析，則可發現泰國之MCMV 分離株應為近年於亞非大發生MCMV 之共同起源。依解序所得MCMV NFU2 分離株之鞘蛋白序列，構築於表現載體後大量表現以製備其多元抗血清，該多元抗血清經測試可用於田間樣本之酵素免疫分析法 (enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA) 檢測。此外，利用其鞘蛋白序列設計專一性引子對MCMV-g3514F/MCMV-g4014R，可以RT-PCR 於單隻玉米薊馬中檢測出MCMV，可作為後續媒介昆蟲傳播MCMV 的機制研究之用。於2014–2015 年間利用MCMV 及甘蔗嵌紋病毒 (Sugarcane mosaic virus; SCMV) 抗體於台灣各地玉米栽培區調查，共檢測306 個樣本，結果顯示MCMV 罹病率達79.7%，MCMV 與SCMV 複合感染造成之玉米致死性壞疽 (maize lethal necrosis; MLN) 罹病率為31.7%；檢測樣本中，白玉米、糯玉米、青割玉米、硬質玉米及7 種甜玉米品種皆可檢出MCMV，食用玉米中「華珍」之罹病率較低，但亦達60%，青割玉米及硬質玉米MCMV 罹病率平均達31.6%。本研究為台灣MCMV 分離株之基因體全長度解序、親緣分析、檢測試劑開發及病害調查之首次報告。

關鍵字：玉米褪綠斑駁病毒、甘蔗嵌紋病毒、親緣分析、檢測試劑、病害調查

下載： PDF 連結