台灣農業研究

夜香花嵌紋病毒百香果分離株分子特性及廣效性分子檢測技術之開發應用

作者:李文立、Chinnapan Thanarut、徐智政、李國基、江芬蘭、陳金枝*

摘要:

本研究以細菌生合成系統誘導表現之夜香花嵌紋病毒 (Telosma mosaic virus; TeMV) 鞘蛋白 (coat protein; CP) 作為抗原,製備出具有廣效檢測TeMV、East Asian passiflora virus (EAPV)、Cowpea aphid borne mosaic virus (CABMV)、Bean yellow mosaic virus (BYMV) 及Soybean mosaic virus (SMV) 等馬鈴薯Y 屬病毒之多元抗體。針對台灣百香果TeMV-DC6 分離株對應其全長度基因體核酸序列,共解得10,022 個核苷酸,於GenBank 登錄序號為MN316594。2017–2019 年期間,利用所研製之TeMV 多元抗體與引子對,調查台灣田間百香果之TeMV 發生率大約32.1–35.8%;而由泰國採集之17 個葉片嵌紋與果實木質化的樣品,TeMV 檢出率為100%。台灣及泰國百香果田間所收集之TeMV 分離株,與泰國已發表之百香果TeMV (AM409188) 之間的CP 胺基酸序列,相同度均高達90% 以上;但不同地理位置所分離到的百香果TeMV 分離株在類緣演化上具有差異性,TeMV-DC6 等9 個台灣分離株自成一類群,與17 個泰國分離株有所區隔。依據台灣和泰國TeMV 分離株設計3 組引子對,以RT-PCR 法檢測兩地之田間百香果TeMV 罹病組織,在受測67 個台灣分離株和17 個泰國分離株中,台灣引子對 (TwTe650u/TwTe650d) 可檢出所有受測的台灣分離株及9 個泰國分離株;而泰國引子對 (ThaTe430u/ThaTe430d) 僅檢出12 個泰國分離株,且無法檢出全部的台灣分離株;由台灣泰國廣效性引子對 (TwTha840u/TwTha840d) 則可檢出全部受測的台灣和泰國分離株。本研究結果顯示,目前台灣和泰國百香果之TeMV 發生概況,並首度完成台灣分離株TeMV-DC6 之全長度基因體核酸序列之定序,釐清台灣與泰國TeMV 不同分離株之類緣差異性,並開發可廣效性檢測台灣和泰國百香果TeMV 分離株之引子對,可提升對不同來源TeMV 之檢測效率。

關鍵字:百香果、夜香花嵌紋病毒、多元抗體、全長度核酸序列、RT-PCR 廣效性檢測

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最後異動時間:2021-11-16 15:29:00
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