作者：夏奇鈮、陳威臣、許秀惠、林楨祐、曹進義、林子凱*

摘要：

本研究採用雙單倍體 (doubled haploid; DH) 作為小孢子供體，於小孢子培養過程中施以誘變處理，建立花椰菜雙單倍體誘變平台。誘變處理包括以紫外光 (ultraviolet; UV) 處理4 個不同結球天數花椰菜DH 品系之小孢子，DH 品系源自「慶農S-65」小孢子培養；以及利用ethyl methanesulphonate (EMS) 處理上述UV 試驗所得之小孢子胚，並將上述兩誘變處理所得DH 植株種植於田間，觀察誘變株發育階段的變化。此外，又以EMS 處理「慶農S-65」花蕾並取其內小孢子進行培養，比較不同濃度處理對小孢子胚分化之影響。誘變結果顯示，以UV 處理小孢子10 s 及20 s，4 個DH 品系之胚分化率為其對照組的23.9–65.1%，但2 種光照時間處理的差異不顯著。接續觀察經UV 處理之小孢子胚發芽率，結果顯示有不同程度之下降，為其對照組之50.9–78.8%。DH32 之小孢子經UV 處理後長出之胚，接續以0.125–0.500% EMS 震盪處理10 min，小孢子胚之發芽率降為對照組的36.4–56.8%，但3 個EMS濃度處理間差異不顯著。取「慶農S-65」花蕾以0.025–0.100% EMS 以靜置浸泡或添加Tween 20 加震盪方式處理5 min 或10 min，結果顯示2 種處理時間之胚分化率皆以0.025% EMS 為最高。但採用震盪處理時，胚分化率會因處理濃度或時間延長而明顯下降。將4 個不同結球天數DH 品系單誘變小孢子 (UV 處理) 及利用雙誘變 (UV 處理小孢子 + EMS 處理小孢子胚) 所得之DH 誘變株與其對照植株定植田間，於栽培84 d 後調查DH 誘變株之發育階段並比較與對照組之差異。綜合而言，誘變株發育階段之改變以提前發育比例較延後者為高，可作為未來預測誘變方向之參考。本誘變平台以DH品系為供體於小孢子培養過程中進行誘變處理獲得DH 誘變株，除可縮短誘變育種時間並提高選拔效率外，DH 具有高度一致性之特性則有助於突變體之辨識。

關鍵字：花椰菜、小孢子培養、雙單倍體、單倍體誘變

下載： PDF 連結