作者：倪蕙芳、陳瑞祥、王美華、蔡東纂、程永雄*

摘要：

本研究主要目的為比對分析台灣地區作物根瘤線蟲的核糖體DNA序列，並藉以設計對根瘤線蟲具有專一及靈敏特性之引子對，配合聚合酵素連鎖反應 (PCR) 增幅技術，研發作物根瘤線蟲之分子檢測系統。利用過去相關研究中所得之植物病原線蟲通用性引子，自南方根瘤線蟲、爪哇根瘤線蟲、花生根瘤線蟲以及水稻根瘤線蟲DNA增幅含內轉錄區間及5.8S之核糖體DNA序列。經選殖解序後發現南方、爪哇及花生等根瘤線蟲彼此間之序列相同度可達99 %，而與水稻根瘤線蟲間之相同度則僅有85％。經以得自南方根瘤線蟲DNA序列設計檢測用PCR引子對Mi148/Mi452，利用此引子對可自根瘤線蟲DNA獲得一約342bp 的專一性增幅產物，而測試其它屬之植物病原線蟲或腐生性線蟲則無類似之PCR產物。利用此引子對可以由病株及土壤中順利偵測到根瘤線蟲之存在。此外，經測試發現此引子對敏感度可達10pg，並可在僅有5隻二齡幼蟲存在的土壤中檢測出根瘤線蟲，顯示此專一性引子對可實際應用於田間作物根瘤線蟲檢測之所需。

關鍵字：根瘤線蟲、聚合酵素連鎖反應、核糖體DNA、內轉錄區間序列、分子檢測

下載： PDF 連結