作者：王強生、廖仁盟

摘要：

細菌轉形為分子生物學相關研究領域實驗室內操作最為普遍之實驗步驟。本文介紹我們所發展之一快速且簡易之細菌轉形法名為「凍熱細菌質體轉形法」，利用此一方法可快速且大量進行細菌之轉形，轉形效率可達8.7Í10⁶轉形株／µg質體DNA。此一凍熱處理細菌質體轉形法僅須15 min，較現有大多數方法耗時75-90 min可節省60-75 min，顯著縮短轉形所需時間。本凍熱處理細菌質體轉形法其步驟如下：將質體DNA與100µl之細菌勝任細胞混合後，置於液態氮內5分鐘進行凍處理，再立即移至37℃進行熱處理5分鐘後，直接塗佈於已在37℃回溫之選擇性培養基，置於37℃下培養16-18小時，即可完成轉形。凍、熱處理後，經30min之恢復培養，雖有助於提高細菌轉形效率，但較為費時。本試驗結果顯示，此一凍熱處理細菌質體轉形法，具快速（少於15分鐘）、簡單、便宜及可大量操作等優點，適合任何分子生物實驗室之經常性使用。

關鍵字：細菌轉形法、凍熱法、大腸桿菌

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