作者：劉季函、賴瑞聲、李宏謨、吳明哲*

摘要：

黃蘗藥材來源為芸香科 (Rutaceae) 黃蘗屬 (Phellodendron spp.) 植物之樹皮，具有清熱解毒、消炎止痢、滋陰通便的功效，黃蘗樹皮含有小蘗鹼 (berberine)，為西藥製劑的重要原料，廣泛被使用於治療腸胃炎、細菌性痢疾等。台灣黃蘗[Phellodendron amurense Rupr. var. wilsonii (Hayata & Kanehira)] 為台灣特有種，小蘗鹼含量高，是黃蘗藥材優異來源，但須生長 6–8 年才可利用，且原生地已過度採集，因此，建立台灣黃蘗懸浮細胞培養系統，是生產小蘗鹼的另一選擇。本研究以台灣黃蘗幼株為材料，進行癒合組織誘導，並探討建立台灣黃蘗細胞懸浮培養之條件，並以小蘗鹼含量為評估指標。結果顯示癒合組織誘導以葉柄為最佳培植體，經暗處理培養於 0.5 mg/L 2,4-D、1.0 mg/L BA 之 MS 基礎鹽類培養基時，可於 28 天後誘導出癒合組織 (callus)，其型態為淡黃色、質地鬆軟、較鬆散，適合作為懸浮細胞培養來源。懸浮細胞培養以 WPM 培養基添加 0.5 mg/L 2,4-D 及 1.0 mg/L BA為基礎培養基，於黑暗中以 100 rpm 轉速震盪培養，生長 20 天時細胞生長量可達9 倍，但癒合組織及前述懸浮細胞培養經 75% 乙醇萃取及 HPLC 檢測分析皆無小蘗鹼含量。本研究於懸浮細胞培養第 18 天添加 2 mg/L BA 及 6 mg/L NAA 可順利誘導小蘗鹼生合成，於第 28 天時懸浮細胞之小蘗鹼含量為 188.68 μg/g dw，本研究可作為台灣黃蘗懸浮細胞培養量產小蘗鹼之基礎，懸浮細胞如以不同生產調節劑處理，也可能誘導出棕櫚鹼及黃蘗鹼等其他藥用成分，具有製藥應用潛力。

關鍵字：台灣黃蘗、癒合組織、懸浮細胞、小蘗鹼、高效液相層析

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