作者：周建銘、陳君弢、蔡錦慧、陳金枝、鄧汀欽*

摘要：

利用合成肽當免疫體原製備具有廣效的抗體，是一種實用的植物病毒診斷工具。我們設計以番茄嵌紋病毒 (Tomato mosaic virus; ToMV) 鞘蛋白基因序列為主體，加上齒舌蘭輪斑病毒 (Odontoglossum ringspot virus; ORSV) 及胡瓜綠斑嵌紋病毒 (Cucumber green mottle mosaic virus; CGMMV) 含表位基因的部分核苷酸序列，組裝成一聚核苷酸。合成聚核苷酸總共由1,136 個鹼基共價連接，以質體轉殖到大腸桿菌中的pUC57 載體中，再轉殖到pET-28a 載體生產表現蛋白，經純化的表現蛋白用以注射白兔生產多原抗血清。利用西方墨漬法 (Western blot) 分析，可檢驗本研究所生產的抗血清與相對應病毒反應的免疫特性及抗原廣效性。製成酶聯抗體免疫酵素分析 (enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA) 試劑，以間接法試驗，除Hibiscus latent Singapore virus (HLSV) 以外，所有供試tobamoviruses 都可有效被檢出。由於一種試劑即可同時檢出多種病毒，將可應用在檢疫或種苗生產時，茄科及葫蘆科種子或蘭花等觀賞作物繁殖體的病毒檢查。

關鍵字：病毒、鞘蛋白、免疫體原、多原抗體、西方墨漬法

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